Автореферат диссертации по медицине на тему Иммуногенетические аспекты этиопатогенеза, прогнозирования и профилактики гестационных а... (клинико-экспериментальное исследование)
РГБ ОД
1 6 О ИТ ПРаВаХ РУКОПИСИ Д"
БЕЛОКРИНИЦКАЯ ТАТЬЯНА ЕВГЕНЬЕВНА
ИЛШУНОГЕНЕТИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ ЭТКОПАТОГЕНЕЗА, ПРОГНОЗИРОВАНИ' II ПРОФИЛАКТИКИ ГЕСТАЦИОННЫХ А/
(клинико-экспериментальное исследова-
14.00.16 - патологическая физио/^ия
АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени »
доктора медицинских наук \
Иркутск - 1995
Работа выполнена в Читинской государственной медицинской академии
Научный консультант:
заслуженный деятель науки РФ, доктор медицинских наук, профессор Б.И. Кузник
Офицальные оппоненты:
доктор медицинских наук, профессор П.М. Явербаум доктор медицинских наук Л.И. Колесникова доктор биологических наук Р.Г. Скворцова
Ведущая организация - Сибирский государственный медицинский университет, г. Томск
..^Защита состоится "_"_ 1995 г. на заседании
диссертационного совета Д 001.41. 01 Восточно-Сибирского научного центра СО РАМН (664003, г. Иркутск, ул. Тимирязева, 16).
С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Президиума Восточно-Сибирского научного центра СО РАМН.
Автореферат разослан "_. _ 1995 г.
Ученый секретарь диссертационного совета, кандидат медицинских наук
Л.Ф. Шолохов
противоречивы, разрозненны, а некоторые важные аспекты проблемы вообще остаются неисследованными.
В литературе имеется достаточно сведений о распределении антигенов HLA при некоторых видах акушерских осложнений: при поздних ге-стозах (Васильева З.Ф., 1980; Аничкова С.И., 1981; Тарасова М.А., 1984; Загородняя Э.Д., 1991; Bolis P.F., 1982; Comino P., 1984; Fujisawa S., 1985), при невынашивании (Григорьева B.B. и соавт., 1982; Нерсисян В.М. и соавт., 1984; Алексеев Л.П. и соавт., 1988) и перенашизании беременности (Иозефсон С.А., 1990).
Работ, посвященных взаимосвязи системы HLA с другими осложнениями беременности, в том числе и с гестационными анемиями, в доступной литературе мы не обнаружили. Однако, имеющиеся факты дают основание предполагать, что возникновение анемий у беременных должно быть генетически обусловлено и связано с гистосовместимостью матери и плода по антигенам HLA. Нарушения иммуногенеза, эритрона и гемостаза при анемиях беременных, на наш взгляд, взаимосвязаны и генетически детерминированы как гипореактивность организма беременной в распознавании идентичных фетальных антигенов.
В настоящее время в клинической практике для лечения вторичных иммунодефицитных состояний с успехом применяются тималин и тимоген - природный и синтетический препараты тимуса пептидной природы, восстанавливающие не только иммунологический гомеостаз, но и ликвидирующие коагуляционные нарушения (Кузник Б.И., 1989; Загородняя Э.Д., 1992; Яковлев Г.М. и соавт., 1992). Между тем, в акушерской клинике при лечении анемий беременных иммуномодуляторы не используются.
Большое внимание исследователей в последние годы привлекают интерлейкины - полипептиды семейства цитокинов, биологически активных регуляторных молекул, различных по структуре и выполняемым функциям. Однако, до настоящего времени интерлейкины при физиологической и осложненной гестации не исследовались.
Основной целью настоящего исследования явилось изучение этиопатогенетических механизмов развития гестационных анемий и разработка на этой основе принципиально новых методов их прогнозирования, профилактики и лечения.
Для реализации этой цели последовательно решались следующие задачи:
1. Выявить этиологическую обусловленность и патогенез развития анемий беременных в зависимости от антигенов HLA женщины и ее мужа.
2. Изучить состояние систем иммуногенеза, гемостаза, неспецифической резистентности, эритрона, уровень ИЛ-1 и содержание белков острой фазы у женщин с физиологическим течением беременности и при анеми&х гестационного периода.
ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ
Актуальность темы. Анемии беременных являются довольно распространенным видом акушерской патологии не только в регионах с высокой рождаемостью, таких как Средняя Азия, но и в Центральной полосе России, Сибири, Забайкалье, на Крайнем Севере, Дальнем Востоке. Частота их по данным различных авторов колеблется от 6,5% до 67% (Джаббарова Ю.К., 1987; Мордухович A.C. и соавт., 1991; Davis Walter Е., 1985; Stoz F. et al., 1987; Lu L.M. et al., 1991 и др.).
Актуальность проблемы определяется не только высокой частотой этой патологии, но и значительным числом тяжелых акушерских и перинатальных осложнений, таких как невынашивание беременности, поздние гестозы, преждевременная отслойка нормально расположенной плаценты, кровотечения в последовом и раннем послеродовом периодах, внутриутробная гипоксия, задержка развития плода, мертворождаемость, гнойно-септические заболевания матери и новорожденного.
Этиологические аспекты гестационных анемий весьма разнообразны и противоречивы. Значительное число исследователей отводят основную роль в развитии анемии при беременности дефициту железа (Димитров Д.Я., 1980; Овчар Т.Т., 1992; Хаджиметов A.A., 1991; Howells M.R. et al., 1986; Kalenga M.K., 1989; Hercberg S., 1990 и др.). Однако практика показывает, что у беременных с анемиями дефицит железа выявляется не всегда, а терапия препаратами железа нэ оказывает желаемого клинико-гематологического эффекта и не снижает количества тяжелых осложнений, одинаково опасных для жизни и здоровья женщины и ее ребенка.
В последние годы появились работы о роли иммунологического фактора в этиопатогенезе анемий беременных (Казиева С.Э. и соавт., 1982; Макаричева А.Д., 1982; Джаббарова Ю.К., 1983; Тахирова К.Х., 1986; Тихонова Л.В. и соавт., 1989; Султанов С.Н. и соавт., 1992 и др.). Л.Ю. Генкин (1982), И.К. Камилова и соавт. (1990) объясняют ряд осложнений, вызванных гестационной анемией, нарушениями факторов коагу-ляционного гомеостаза организма беременной.
Патологические полисистемные изменения, которые развиваются при анемиях беременных в результате неадекватной реакции адаптационных систем организма матери на фетальные антигены, позволяют считать гестационные анемии гематологической формой гестозов.
Имеющиеся в современной литературе данные об изменениях иммуногенеза и гемостаза у женщин с анемиями гестационного периода
3. Исследовать влияние полипептидов эритроцитов на иммунитет, гемостаз, неспецифическую резистентность в опытах in vitro.
4. Провести сравнительное исследование влияния традиционных антианемических препаратов, иммуномодуляторов и полипептидов эритроцитов на системы эритрона, иммунитета, гемостаза беременных крыс с индуцированными анемиями и их потомство.
5. Сравнить влияние предложенного нами и существующих методов лечения гестационных анемий на иммуногенез, гемостаз, неспецифическую резистентность организма, уровень ИЛ-1 и содержание белков острой фазы, течение и исход беременности и родов.
6. Разработать метод прогнозирования, доклинической диагностики и профилактики гемогестоза по антигенам HLA, показателям иммунитета, гемостаза, концентрации ИЛ-1 и реактантов острой фазы.
Научная новизна. Впервые выявлена генетическая предрасположенность к возникновению гестационных анемий. Установлена этиологическая обусловленность развития заболевания при определенных антигенах HLA беременной и степени совместимости супружеских пар. Установлена возможность прогнозирования не только риска развития анемии в гестационном периоде, но и степени ее тяжести.
Работа является первым исследованием, в котором изучено содержание ИЛ-1 у здоровых нёбеременных женщин, при физиологически протекающем гестационном процессе и при анемиях беременных, установлена взаимосвязь между показателями систем иммуногенеза, гемостаза, неспецифической резистентности, эритрона, концентрацией ИЛ-1 и белков острой фазы, отражающая ключевые этиопатогенетические механизмы возникновения гестационного малокровия.
Дано экспериментальное и патогенетическое обоснование применения иммунокоррегирующей терапии и профилактики гемогестозов. Выявлено нормализующее влияние тималина и тимогена не только на показатели иммуногенеза, гемосгаза, неспецифической резистентности, уровень белков острой фазы, но и на содержание ИЛ-1 и систему эритрона.
Доказан высокий клинический эффект применения иммуномодуляторов, проявляющийся в значительном снижении количества осложнений при беременности, в родах, пуэрперальном и неонатальном периодах у женщин с гестационными анемиями и их детей.
Предложены методы прогнозирования, доклинической диагностики и профилактики анемий беременных.
Определены пути получения новых высокоэффективных антианемических препаратов: из эритроцитов крупного рогатого скота выделено вещество полипептидной природы и изучено его влияние на иммунитет, гемостаз, неспецифическую резистеность и эритрон в эксперимент. По казано, что при токсической и постгеморрагической анемиях у боровом-
ных крыс полипептиды эритроцитов восстанавливают регенераторный потенциал эритрона, увеличивают количество лейкоцитов, замедляют время свертывания крови и активируют фибринолиз, ликвидируя тем самым фетоплацентарную недостаточность и оказывая благоприятное влияние на потомство.
Практическая ценность работы. Выявленная генетическая предрасположенность к развитию гемогестозов при наличии у женщины определенных антигенов ША и гистотипирование обеих супругов по Н!_А-антигенам позволяют выделить группы риска в развитии анемий при беременности.
На основании предложенной концепции этиологии и патогенеза гестационных анемий, в которой пусковым моментом является нарушение иммунного ответа матери на чужеродные антигены плода, разработаны методы их прогнозирования, доклинической диагностики, профилактики и лечения.
Предложен патогенетически обоснованный метод комплексной терапии и профилактики анемий беременных с использованием иммуно-корректоров тималина и тимогена.
Установлено, что под влиянием тималина и тимогена происходит активация иммунитета и эритропоэза, нормализация коагулологических показателей, что приводит к снижению в 1,7 - 2 раза количества акушерских и перинатальных осложнений таких, как преждевременные роды, слабость родовых сил, кровотечения, обусловленные нарушениями процессов отделения плаценты и снижением сократительной способности миометрия, задержка внутриутробного развития плода, асфиксия плода и новорожденного, гнойно-септические послеродовые и постнатальные заболевания.
Способность полипептидов эритроцитов восстанавливать регенераторный потенциал эритрона при различных видах экспериментальных анемий, стимулировать иммунитет и неспецифическую резистентность, ликвидировать ДВС-синдром дает основание считать их перспективными для клинического применения в терапии анемий различного генеза.
По материалам работы оформлено 4 предложения для практического здравоохранения. Изданы учебно-методические рекомендации "Прогнозирование и ранняя диагностика гемогестоза", "Ведение беременности, родов и послеродового периода при гестационных анемиях", "Прогнозирование послеродовых гнойно-септических заболеваний у больных гестационными анемиями". Разработанные методы прогнозирования, доклинической диагностики, профилактики и лечения гемогестозов внедрены в лечебную практику службы родовспоможения города Читы и Читинской области.
Результаты исследований вошли в инструкцию по клиническому применению тимогена (протокол Фармкомитета СССР N 1 от 13 января 1989 г.). Поданы документы для оформления Российского патента на способ получения вещества из эритроцитов.
Результаты работы внедрены в учебный процесс кафедр нормальной и патологической физиологии, акушерства и гинекологии Читинской медицинской академии, кафедры физиологии человека Читинского педагогического института.
Апробация работы. Результаты исследования были доложены на X, XI межвузовских конференциях молодых ученых "Физиология и патология иммуногенеза и гемостаза" (Чита, 1988; 1989), на научно-практической конференции "Цитомедины" (Чита, 1988), на Всесоюзной конференции "Стресс и иммунитет" (Ростов-на-Дону, 1989), на научно-практической конференции "Эндемические болезни Забайкалья" (Чита, 1989), на советско-корейской конференции "Поиск новых лекарственных средств и их использование в клинике" (Чита, 1990), на Всесоюзной конференции "Физиология и патология гемостаза" (Полтава, 1991), на научной конференции "Механизмы патологических реакций" (Новокузнецк, 1991), на межвузовской конференции "Регуляторные пептиды в норме и патологии (цитомедины)" (Чита, 1991), на симпозиуме "Пептидные биорегуляторы - цитомедины" (Санкт-Петербург, 1992), на конференции молодых ученых "Физиология и патология перекисного окисления липидов, гемостаза, иммуногенеза" (Полтава, 1993), на 3 съезде Физиологического общества Российской Академии Наук (1994), на XII международном конгрессе фармакологов "Молекулярные механизмы современных лекарственных средств" (Монреаль, 1994), на 1-ом международном конгрессе по иммунореабилитации (Сочи-Дагомыс, 1994), на Российской научной конференции "Экологическая патология: вопросы биохимии, фармакологии, клиники" (Чита, 1995), на XII конференции "Факторы клеточного и гуморального иммунитета при различных физиологических и патологических состояниях" (Челябинск, 1995), на конференции "Актуальные вопросы службы крови и трансфузиологии" (Санкт-Петербург, 1995), на II съезде физиологов Сибири и Дальнего Востока (Новосибирск, 1995), на со-зместном заседании кафедр нормальной и патологической физиологии Нитинской медицинской академии и областного научно-практического эбщества акушеров-гинекологов (Чита, 1995).
Публикации. По тема диссертации опубликовано 43 работы.
Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 313 границах машинописного текста, иллюстрирована 49 таблицами и 28 )исунками и состоит из введения, обзора литературы, описания мате-зиалов и методов исследований, трех глав собственных наблюдений, обсуждения полученных данных, выводов, практических рекомендаций и
указателя литературы, включающего 291 отечественных и 203 иностранных источников.
Положения, выносимые на защиту.
1. Гестационные анемии являются иммунозависимой патологией, обусловленной снижением иммунного ответа матери на аллоантигены плода вследствие генетической предрасположенности при наличии у беременной и ее супруга определенных антигенов Н1_А и высокой степени их идентичности. Гистотипирование супружеских пар позволяет выделить среди беременных группу риска по возникновению анемий в гестацион-ном периоде.
2. При анемиях беременных имеют место полисистемные нарушения: иммунологическая толерантность с преобладанием иммуносупрес-сии, снижение неспецифической резистентности организма, хронический ДВС-синдром, дисбаланс белков острой фазы, снижение уровня ИЛ-1. угнетение эритропоэза, что позволяет считать данный вид патологии гематологической формой гестозов.
3. Применение иммуномодуляторов для профилактики и терапии анемий гестационного периода патогенетически обосновано и приводит к нормализации иммуногенеза, гемостаза, эритрона, неспецифической резистентности, уровня ИЛ-1 и белков острой фазы, а также способствует более благоприятному течению беременности, родов послеродового периода, снижению перинатальной заболеваемости.
4. Для доклинической диагностики гемогестоза, прогнозирования течения беременности, родов, пуэрперального периода, оценки эффективности проводимой терапии должны использоваться некоторые показатели иммунитета, гемостаза, содержания ИЛ-1 и реактантов острой фазы.
5. Комплекс полипептидной природы, полученный из эритроцитов, восстанавливает регенераторный потенциал эритрона при различных видах экспериментальных анемий, оказывает стимулирующее влияние на иммуногенез и неспецифическую резистентность, обладает антипротеаз-ным действием, способствуя ликвидации проявлений ДВС-синдрома, что позволяет считать его перспективным для клинического применения при лечении анемий различного генеза.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
Обследованы 520 женщин в возрасте от 17 до 40 лет, из которых 50 здоровых небеременных и 100 беременных с неосложненным течением гестационного периода составили контрольные группы, 70 беременных с анемиями различной степени тяжести получали общепринятое ле-
чонио (пропараты железа, витамины), 140 - комплексную антианемическую и иммунокоррегирующую терапию (тималин или тимоген), 60 -традиционную терапию анемии и гепарин, у 100 женщин в динамике беременности исследовались концентрация ИЛ-1, состояние иммуногенеза, гемостаза и эритрона. 24 беременным группы риска для профилактики гестационной анемии вводили иммуномодуляторы.
Анемия легкой степени была у 204 (75,6%); средней - у 54 (20%); тяжелой - у 12 (4,4%) беременных.
С целью изучения распределения антигенов системы HLA 1 класса при физиологически протекающей и осложненной анемией беременности проведено гистотипирование антигенов HLA у 100 здоровых беременных, 100 больных гестационными анемиями, а также у 100 супружеских пар, в которых 36 беременных, имели нормальные показатели гемограмм и 64 страдали анемиями гестации.
Степень относительного риска развития заболевания рассчитывалась по формуле Е. Woolf (1955):
Рк ( 1 - Рп ) \>
И = ..................... , где
Рп ( 1 - Рк )
Р - степень риска предрасположенности к определенному патологическому процессу;
- частота встречаемости антигена в популяции;
Р|< - частота встречаемости антигена у больных данным заболеванием.
Из анамнеза выявлено, что у женщин с гестационными анемиями в прошлом чаще, чем у беременных с нормальными показателями гемограмм, имели место спонтанные аборты (16,1% против 4,8%), преждевременные роды (9,9% против 3,4%), мертворождения (4% против 1%), кровотечения в родах (5,6% против 2%).
В течение настоящей беременности^ у больных гестационными анемиями чаще, чем у здоровых беременных, развивались ранние (28,2% против 16%) и поздние токсикозы (32,2% против 16%), угроза срыва беременности (19,1% против 2%), внутриуфобная гипоксия плода (22,3% против 6%), задержка внутриутробного развития плода (14,8% протис 3,4%).
Внутриутробное состояние плода оценивали <; гюг.ющкга фуш ипп н^пним* проб, пшпрптт "Биофотомопигор" (ГДР), пмрт.пут.опот опчи-
рования в реальном масштабе времени на аппаратах "Алока" и "Тошиба" САЛ-35, при рождении по методу V.Apgar (1953).
Для изучения действия иммуномодуляторов и полипептидов эритроцитов на эритрон, иммуногенез, гемостаз, неспецифическую резистентность, течение беременности, потомство, проведены экспериментальные исследования на самках 150 нелинейных белых крыс с индуцированными анемиями и крови 40 здоровых доноров и 40 больных вторичными иммунодефицитами (ожоговая болезнь II-III степени). Постгеморрагическую анемию вызывали эксфузией крови из яремной вены животного, токсическую анемию - введением солянокислого фенилгидразина (Русинова Г.Г., 1980).
30 самок в эксперименте были интактными небеременными, 120 -беременными, при этом первым днем гестации считали момент обнаружения во влагалищном секрете сперматозоидов после подсадки самца. На 8 день гестационного периода половине животных вызывали геморрагическую или токсическую анемию. На 13 день крыс делили на следующие группы: 1 (контроль) - вводили физиологический раствор; 2 - препарат железа Феррум Лек и витамин В,г; 3 - тималин; 4 - тимоген; § - полипептиды эритроцитов. После рождения потомства оценивали его состояние, часть самок забивали и исследовали костный мозг из бедренной кости.
Полипептиды из эритроцитов крупного рогатого скота получали разработанным нами оригинальным методом уксусно-кислой экстракции.
Определение антигенов системы HLA 1 класса (А, В, С) проводили с помощью лимфоцитотоксического теста с использованием микрооборудования по Терасаки (1968) и панели N 25 антилейкоцитарных HLA-гистотипирующих сывороток Республиканского центра типирования тканей (С.-Петербург).
Концентрацию И/1-1 определяли иммуноферментным методом двойных антител (Институт особо чистых биопрепаратов, г.С.-Петербург).
Исследование системы иммуногенеза проводили следующими методами: содержание лейкоцитов (камерный метод), лимфоцитов (в мазке периферической крови), Т-лимфоцитов (Jondal М. et al., 1972), Т-"активных" клеток (Kerman R.-et al., 1976), Т-хелперов и Т-супрессоров -теофилиновым методом (Shore А. et al., 1978), B-лимфоцитов (Bianco С. et al., 1973), концентрация иммуноглобулинов А, М, G (Laureil G., 1966), циркулирующие иммунные комплексы (Digeon М. et al., 1977).
Коагуляционный гемостаз и фибринолиз оценивали по следующим шстам: тромбоэласюграфии (Балуда В.П. и соавь. 1980), времени свертывания кропи (Leo R., White P., 1913), время ррк.апьцификации плазмы (Bergerhof Н., Roka I., 1954), каолин-кефалинипое промч (l.amen М et al., 1957 модификация Бпркамня З.С., 1975). профии'нчюлпр прямя (Quin!;
А., 1943), тромбиновое время (Sirmay Е., 1957), уровень антитромбина III (Laurell G., 1966), этаноловый тест (Godai H., 1971), протаминсульфатный тест (Lipinski A. et al., 1968), концентрация фибриногена (Рутберг Р.А., 1962), продукты деградации фибриногена и фибрина (Laurell G., 1966), тотальный эуглобулиновый фибринолиз (Kowarzyk H., Buluk L., 1954), xa-геман-зависимый (каолиновый) фибринолиз (Веремеенко К.Н., 1978).
Уровень реактантов острой фазы (церулоплазмина, орозомукоида, СЗ компонента комплемента, апьфа-1-антитрипсина, альфа-2-макрогло-булина) и контрреактантов острофазовых реакций (преальбумина, транс-феррина) определяли методом ракетного иммуноэлектрофореза (Laurell G., 1966) с использованием моноспецифических антисывороток фирмы "Севак" ЧССР.
Содержание сывороточного железа изучали с помощью коммерческих наборов "Хемапол" (ЧССР).
Неспецифическую резистентность оценивали в тесте восстановления нитросинего тетразолия, по содержанию лизосомальных катионных белков (Пигаревский В.Е. и соавт., 1981). Фагоцитарную активность ней-трофилов исследовали с добавлением суточной культуры стафилококка по методу Н.В. Васильева и соавт. (1972).
Уровень гемоглобина определяли на фотоэлектрокапориметре (ФЭК-2), подсчет форменных элементов крови - камерным методом, количество ретикулоцитов - при микроскопии мазков крови, окрашенных бриллиантовым крезиловым синим.
Математический анализ проведен с помощью метода вариационной статистики с определением различий по критерию Стьюдента. Статистический обсчет всех параметров выполнен на компьютере IBM РС-486DX пакетом "Statgraf".
РЕЗУЛЬТАТЫ.ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ 1. Распределение антигенов HLA при гестационных анемиях
Результаты гистотипирования антигенов системы HLA 1 класса здоровых и больных гестационными анемиями беременных представлены в таблицах 1,2.
Нами установлено, что при анемиях беременных чаще встречаются антигены HLA А2, А24, А25, В13, В18 и реже - антиген HLA A3. Последний, согласно данным R. Fauchet и соавт.(1980), связан с гипотетическим геном, контролирующим в организме мэтаболизм железа. Исследуемые нами антигены локуса С у здоровых и больных анемиями беременных выявлялись с одинаковой частотой.
Показатели риска развития гестационных анемий у беременных с различными Н1_А-антигенами
Антигены Н1А Частота встречаемости, % Степень риска
Здоровые беременные Беременные с анемией
А-1 38,09 16,67 0,28
А-2 46,02 57,67 2,5
А-3 23,81 16,67 0,69
А-9 21,2 26,7 1,4
А-10 11,28 13,33 1,8
А-24 - 1,74
А-25 3,14 6,7 2,4
А-28 12,6 1.74 0,14
В-5 26,7 18,33 0,59
В-7 26,7 18,1 0,6
В-8 16,9 25,4 1,6
В-12 11,8 20,2 2,02
В-13 9,52 20,6 2,2
В-14 15,2 8,3 0,55
В-15 9,4 6,8 0,68
В-16 10,5 5,12 0,47
В-17 6,8 8,1 1,14
В-18 5,2 13,3 2,84
В-27 9,52 10,4 1,16
В-35 19,04 10,4 0,47
В-40 9,52 5,3 0,5
Высокая степень риска развития анемии при беременности выявлена при фенотипах А2,9; В5.13; В18.35; при гаплотипах А2В8; А2В18; А9В8. Фенотипы В5,8; В7,13 и генотипы А2,9,В5,13; А2,25,В12,18 зарегистрированы нами только у больных гестационным малокровием, среди беременных с нормальными показателями гемограмм они вообще не встречались.
Известно, что заболевания с иммунопатологическими механизмами развития чаще всего ассоциируются с локусом В, который тесно сцеплен . с генами иммунного ответа (Алексеев Л.П. и соавт., 1988).
В наших исследованиях частота встречаемости антигенов В5, В7, В27 у больных гестационными анемиями возрастала пропорционально степени тяжести заболевания и была соответственно 16,7%, 16,7% и 1,5% при анемии легкой степени и 25,6%, 25,6% и 25% - при тяжелой. При легкой форме малокровия беременные чаще имели гаплотип А9В8 и фенотип В5.8; при средней • гаплотипы А2,В5; А10.В13 и фенотип В5,13; При тяжелой - А2,В7 и В7.13.
Таблица 2
Показатели риска развития гестационных анемий у беременных с различными НЬА-фенотипами, Н1-А-гаплотипами и Н1-А-генотипами
- Частота встречаемости, %
HLA-фенотип HLA-гаплотип HLA-генотип Здоровые беременные Беременные с анемией Степень риска
Фенотип:
А2,9 4,1 13,33 3,59
В5,8 - 5,1 -
В5.13 1,9 6,67 3,69
В18.35 1,2 6,67 7,1
В7.13 - 6,67 -
Гаплотип:
А2, В8 3,12 11,3 4,0
А2, В18 1,73 9,86 6,7
А9, В8 2,03 13,4 8,8
Генотип:
А2,9, В5,13 - 5,0
А2,25, В12.18 - 3,12 -
При исследовании антигенов системы HLA беременной и ее мужа ыявлено, что. при анемиях супруги были идентичны по антигенам 1 клас-а главного комплекса гистосовместимости в 6,6 раз чаще, чем при нео-пожненной гестации.
Установлена зависимость между степенью тяжести анемии бе-эменной И количеством идентичных антигенов HLA у супружеской пары, зк при малокровии легкой степени супруги .были совместимы не более, эм по двум антигенам HLA; при средней - по. трем; при тяжелой - по че->|рем. При физиологически протекающей беременности ни в одном слу-19 не зарегистрировано идентичности мужа и жены более, чем по двум зйкоцитарным антигенам (таблица 3). У больных анемиями гестационно-I периода отмечена совместимость с антигенами мужа по сублокусу А2 37,5%, сублокусу А10 - в 25%, сублокусу А1 - в 9,4%, В7 - в 9,6%, по плотипу А10.В7 - в 6,3% случаев.
Совместимость супружеских пар по антигенам Н1_Д при физиологической и осложненной анемией беременности
Параметры Степень тяжести анемии беременных, %
Совместимость по антигенам ША Физиологическая беременность п=36 Легкая п=34 Средняя п=21 Тяжелая п=9
Совместимы по антигенам Н1А (всего) 13,3 85,2 85,7 88,8
По 1 антигену: 10,0 72,4 77,8 25,0
- сублокуса А 10,0 62,1 55,6 25,0
- сублокуса В - 10,3 22,2 7
По 2 антигенам: 3,3 10,3 33,3 37,5
- по 2 сублокуса А 1,65 6,9 16,6 12,5
- по 1 сублокуса А и 1 сублокуса В 5,6 12,5
- по 2 сублокуса В 1,65 3,4- 11,1 12,5
По 3 антигенам: - - 5,6 25,0
- по 2 сублокуса А и 1 сублокуса В 5,6 12,5
- по 1 сублокуса А и 2 сублокуса 12,5
По 4 антигенам: - - 12,5
- по 2 сублокуса А и 2 сублокуса В % 12,5
Таким образом, полученные результаты позволяют считать, что ге-стационные анемии генетически детерминированы и связаны с генами иммунного ответа В5, В7, В27. Идентичность супружеских пар, а следовательно, недостаточное различие между матерью и плодом, является не-
благоприятным фактором для течения беременности. Выраженный гетерозис супругов по системе Н1-А характерен для физиологически протекающего гестационного процесса. При анемиях беременных в 6,6 раз чаще, чем при неосложненной гестации, муж и жена совместимы по антигенам Н1А а степень тяжести заболевания пропорциональна количеству сходных антигенов.
2. Состояние иммуногенеза и неспецифической резистентности у беременных с гестационными анемиями
Система иммунитета играет ведущую роль в поддержании нормальных биологических взаимоотношений между матерью и плодом, и, следовательно, в обеспечении физиологического течения гестационного процесса.
В III триместре неосложненной беременности происходит уменьшение количества Т- и В-лимфоцитов по сравнению с небеременными женщинами, а при гестационных анемиях продолжает снижаться. Число О-клеток понижается при легкой и средней степени анемизации и возрастает при тяжелой, что, по мнению П.И.Фогел (1982), отражает реакцию матери на антигены плода.
При физиологически протекающей беременности количество Т-супрессоров в 2,5 раза меньше, чем у здоровых небеременных женщин. При анемиях беременных их содержание увеличивается по мере снижения уровня гемоглобина. Абсолютное и относительное число Т-"активных" клеток и Т-хелперов у беременных в 1,3 раза меньше, чем у небеременных, а при гестационных анемиях прогрессивно снижается пропорционально степени тяжести патологического процесса.
У здоровых беременных хелперно-супрессорный коэффициент в наших исследованиях составил 4, у больных гестационным малокровием -2,2; 1,7; 1,5 (соответственно легкая, средняя, тяжелая степень) и свидетельствовал об усилении иммуносупрессии по мере усугубления анемии.
Гуморальные факторы иммунитета у больных гестационными анемиями характеризуются увеличением содержания lg А и lg М и снижением уровня lg G по мере прогрессирования заболевания.
Известно, что образование ИК является одним из компонентов нормального иммунного ответа, однако дисбаланс фракций ЦИК различной молекулярной массы свидетельствует о его срыве (Константинова Н.А., 1986).
Концентрация ЦИК у здоровых беременных была ниже, чем у больных анемиями гестационного периода. Уровни мелких и крупных иммунных агрегатов прогрессивно возрастали пропорционально степени тяжести анемии. При этом концентрация мелкомолекулярной фракции, обладающей наибольшей патогенностью, изменялась значительнее и при тяжелой степени анемии была в 1,5 раза больше, чем у женщин с нео-сложненной беременностью, что является признаком деструктивных процессов в тканях.
У здоровых беременных по сравнению с небеременными функциональная активность нейтрофилов периферической крови повышалась, о чем свидетельствовало снижение содержания лизосомальных катионных белков. При гестационных анемиях секреторная и медиаторная функции нейтрофильных гранулоцитов изменялись и зависели от уровня гемоглобина. При анемиях легкой и средней степени тяжести количество лизосомальных катионных белков значительно превышало показатель здоровых беременных, что, вероятно, является компенсаторной реакцией организма в условиях имеющегося вторичного иммунодефицита. При анемии тяжелой степени активность фагоцитов резко угнеталась, что может быть обусловлено недостаточностью активирующих факторов со стороны иммунной системы, например, цитокинов, и анемической гипоксией в тканях.
По мере уменьшения концентрации гемоглобина у больных анемиями беременных снижался фагоцитарный индекс и показатель завершенности фагоцитоза.
Концентрация СЗ компонента комплемента у здоровых беременных выше, чем у небеременных женщин. При гестационных анемиях его содержание падает пропорционально степени тяжести заболевания, что связано с уменьшением синтеза в клетках трофобласта и потреблением при образовании иммунных комплексов (Ока\л/а Я. е1 а1., 1983).
Таким образом, полученные результаты позволяют считать, что при гестационных анемиях угнетаются реакции неспецифической защиты и развивается клеточный и гуморальный иммунодефицит, степень выраженности которых зависит от тяжести заболевания.
3. Состояние системы гемостаза у беременных с гестационпыми анемиями
Для здоровых беременных в 111 триместре гестации по сравнению с небеременными женщинами характерна гиперкоагуляция и угнетение фибринолиза, о чем свидетельствуют укорочение времени свертывания
крови на 31,6%, времени рекальцификации плазмы на 19,5%, тромбино-вого и каолин-кефалинового времени, уменьшение содержания АТ-Ш на 11,1%, увеличение концентрации фибриногена на 45,7% и ПДФ - на 88,6%, появление в 20% положительного этанолового и в 18% - прота-минсульфатного тестов, торможение тотального и хагеман-зависимого фибринолиза соответственно на 64% и 97%.
При гестационных анемиях, по сравнению со здоровыми беременными, пропорционально тяжести заболевания укорачивается время свертывания крови и рекальцификации плазмы, тромбиновое и каолин-кефалиновоо время. По сравнению с беременными, имеющими нормальные показатели гемограмм, концентрация фибриногена увеличена на 32,4%, ПДФ - на 155%, уровень АТ-Ш снижен на 18,2%. Еще более заторможены тотальный (на 15,6%) и хагеман-зависимый (на 37,7%) фибрино-лиз, чаще выпадают положительные этаноловый (89,2%) и протамин-сульфатный (54,2%) тесты. Количество тромбоцитов при гестационном малокровии зависит от уровня гемоглобина: чем тяжелее анемия, тем меньше их число (р < 0,05).
Таким образом, при гестационных анемиях имеют место выраженная активация внутрисосудистого свертывания крови и депрессия фибринолиза. Наиболее информативными показателями для оценки тяжести заболевания, прогнозирования вероятности возникновения геморрагических осложнений, оценки эффективности лечения являются количество тромбоцитов, концентрация АТ-Ш, фибриногена и ПДФ.
4. Уровень белков острой фазы и ИЛ-1 у беременных с гестационными анемиями
В настоящее время особое внимание при изучении патогенеза заболеваний уделяется реактантам острой фазы, которые играют важную роль в неспецифической защите, иммунологических реакциях, свертывании крови; сосудисто-тромбоцитарном гемостазе и фибринолизе (Кузник Б.И., Цыбиков H.H., 1983-1989; Веремеенко K.M., 1985; Kudo L, et al., 1982; Dean R.T. et al., 1984 и др.).
У женщин с неосложненной гестацией, по сравнению с небеременными, отмечается увеличение концентрации трансферрина и альфа-1-антитрипсина, содержание остальных острофазных белков достоверных отличий не имеет.
При гестационных анемиях по сравнению со здоровыми беременными на 98% возрастает содержание церулоплазмина, на 62% - концентрации альфа-1 -антитрипсина. Увеличение церулоплазмина может быть
расценено, как защитно-приспособительный процесс, ибо этот белок способствует активации иммунных реакций и кроветворения (Shimizu М., 1982; Kojima Е. et al., 1986). Повышение уровня иммуносупрессивного белка альфа-1-антитрипсина - патологическая реакция, поскольку способствует усилению имеющегося иммунодефицита и угнетению фибри-нолиза (Brolt S. et al., 1985).
При гестационном малокровии в отличие от беременных с нормальными показателями эритрона на 41% снижается содержание альфа-2-макроглобулина и на 25% - трансферрина. Уменьшение концентрации альфа-2-макроглобулина при анемиях беременных связано, вероятно, с повышенным потреблением его в гемостазиологических реакциях, направленных на ликвидацию имеющегося ДВС-синдрома. Падение уровня трансферрина является результатом его повышенного потребления для обеспечения максимального поступления железа в костный мозг. Содержание сывороточного железа у больных анемиями гестационного периода в наших исследованиях не имело достоверных отличий от показателей здоровых беременных, что позволяет заключить, что не дефицит железа является первопричиной возникновения гестационного малокровия.
Концентрация преальбумина в течение физиологической беременности практически не отличается от небеременных женщин, а при геста-ционных анемиях - снижается пропорционально степени тяжести заболевания (р<0,01), что служит косвенным признаком глубины патологических изменений в иммуногенезе и течении обменных процессов.
Полученные результаты позволяют сделать вывод, что при гестаци-онных анемиях увеличивается концентрация иммуносупрессивных белков и снижается уровень контрреактантов острой фазы. В результате образуется порочный круг: иммунодефицит, вызвавший нарушения функции органов и тканей, приводит к диспротеинемии, которая, в свою очередь, усугубляет имеющиеся патологические изменения в иммуногенезе. О глубине патоморфологических нарушений можно судить по содержанию преальбумина: чем ниже его уровень, тем тяжелее гестационная анемия.
Нами также изучена динамика ИЛ-1 при физиологической и осложненной анемией беременности. Данное исследование было предопределено тем, что ИЛ-1 обладает полифункциональными свойствами и является одним из основных медиаторов организма при ответе на любые, в том числе и антигенные, воздействия (Чередеев А.Н., 1990; Ломакин М.С., Арцимович Н.Г., 1991; Logan А., 1992).
Содержание ИЛ-1 при неосложненной беременности повышается в 2,9 раза по сравнению со здоровыми небеременными женщинами (р<0,001) что, на наш взгляд, обусловлено стимулирующим влиянием антигенов плода на интерлейкин-продуцирующие клетки.
1 2 3 4 5
1 - небеременные женщины; 2 - здоровые беременные; 3 - беременные с анемией легкой степени; 4 - беременные с анемией средней степени; 5 - беременные с анемией тяжелой степени.
* - достоверные различия по сравнению со здоровыми беременными
Рис. 1. Содержание интерлейкина-1 в сыворотке беременных с анемиями (ед/мл).
У больных гестационным малокровием уровень ИЛ-1 ниже, чем у беременных с нормальными показателями системы эритрона, и коррелирует со степенью тяжести заболевания. Так, при тяжелой анемии концентрация ИЛ-1 в 3,4 раза меньше, чем у здоровых беременных и в 1,2 раза ниже'показателя небеременных женщин (рисунок 1).
Исходя из множественности функций молекулы ИЛт'!, можно предположить, что дефицит последнего у беременных с анемиями является ключевым патогенетическим звеном возникновения полисистемных взаимообусловленных нарушений гомеостаза: депрессии иммунитета и неспецифической защиты, диспротеинемии с увеличением реактантов и уменьшением контрреактантов острой фазы, патологической гиперкоагуляции и угнетения фибринолиза, которые, в свою очередь, вызывают функциональные и морфологические изменения в фетоплацентарном
комплексе, приводя к развитию серьезных для матери и плода осложнений.
5. Экспериментальные исследования полипептидов эритроцитов in vitro и in vivo
В современной литературе мы не обнаружили сведений о цито-мединах, избирательно влияющих на эритропоэз, хотя сама концепция предполагает, что такие вещества должны существовать.
В связи с этим по разработанной нами оригинальной методике был получен полипептидный препарат из эритроцитов, условно названный "эритроцитин" и изучено его влияние на иммунитет, неспецифическую резистентность организма, гемостаз и систему эритрона в экспериментах in vitro и in vivo.
5.1. Влияние полипептидов эритроцитов на иммунитет, неспецифическую резистентность организма и гемостаз
В экспериментах in vitro установлено, что эритроцитин увеличивает число Т-"активных" лимфоцитов у здоровых доноров (р<0,01) и еще в большей степени оказывает активирующее действие на лимфоциты больных с вторичными иммунодефицитами (ожоговая болезнь), усиливая экспрессию рецепторов на поверхности Т-"активных" и Т-общих клеток более, чем в 2 раза (р<0,01). Существенного влияния эритроцитина на В-лимфоциты мы не выявили.
При первичном контакте полипептидов эритроцитов с лейкоцитами в прямой реакции [отмечено усиление их миграции, о чем свидетельствовало увеличение индекса и зоны распространения лейкоцитов (р<0,05). В непрямой реакции добавление в культуральную среду эритроцитина существенно не влияло на миграцию лейкоцитов, так же как и его повторное введение, что позволяет сделать вывод об отсутствии сенсибилизации лимфоцитов полипептидами из эритроцитов. Предварительное инкубирование лимфоцитов с ФГА и эритроцитином приводило к торможению миграции.
Полученные результаты свидетельствуют о том, что эритроцитин не обладает антигенными свойствами, не вызывает секрецию лимфоки-нов, тормозящих миграцию лейкоцитов. Однако введение митогенов на фоне эритроцитина приводит к усилению торможения миграции лейкоцитов.
Нами изучалось влияние эритроцитина на кислородзависимые процессы нейтрофилов периферической крови человека в тесте восстановления нитросинего тетразолия (НСТ-тест). При инкубации клеток в
присутствии эритроцитина дозоэависимо в 2-4 раза повышалось количество НСТ-положительных форм нейтрофилов (р<0,001), что свидетельствует об усилении их фагоцитарной активности. Эффект, очевидно, обусловлен воздействием полипептидов на рецепторный аппарат клеточной мембраны с последующей активацией НАДФ-Н-оксидазы.
Нами установлено, что в присутствии эритроцитина содержание лизосомальных катионных белков в нейтрофилах существенно снижается, при этом отмечается обратная зависимость среднего цитохимического коэффициента фагоцитов от концентрации эритроцитина в инкубационной смеси (р<0,001).
Результаты данной серии опытов свидетельствуют о способности эритроцитина активировать фагоцитарную функцию нейтрофилов, сопровождающуюся выходом из гранул неферментных катионных белков.
Исследование влияния эритроцитина на фагоцитарную реакцию нейтрофилов по отношению к микробной тест-культуре подтвердили данные, полученные в ЛКТ и НСТ-тесте. Добавление полипептидов эритроцитов в лейкоцитарно-микробную взвесь дозоэависимо приводит к повышению фагоцитарного показателя, фагоцитарного индекса и завершенности фагоцитоза (р<0,001).
Таким образом, все тесты, характеризующие фагоцитарные функции, убедительно доказывают, что эритроцитин обладает активирующим влиянием на фагоциты.
Одной из важных систем неспецифической резистентности организма является система комплемента, активация которой в конечном итоге приводит к образованию мембрано-атакующего комплекса, способствующего разрушению измененных клеток. Кроме того, компоненты системы комплемента выполняет функции неспецифичоского регулятора иммунного ответа (Menth J., 1983; Edward T., Befus A., 1984), являются связующим звеном между системами иммуногенеза и гемостаза (Ложкина А.Н., 1988; Кузник Б.И. и соавт., 1989).
При изучении влияния эритроцитина на классический и альтернативный пути активации комплемента выявлено, что полипептиды эритроцитов являются ингибиторами комплементарного лизиса.
Эритроцитин не вызывает спонтанной и не влияет на АДФ-индуцированную агрегацию тромбоцитов, дозоэависимо увеличивает время рекальцификации плазмы (р<0,001), тормозит эуглобулиновый фибринолиз (р<0,001), что, вероятно, обусловлено его антипротеазным действием.
Таким образом, полипептиды эритроцитов оказывают выраженное влияние на иммунитет, неспецифическую резистентность организма и гемостаз. Эритроцитин повышает экспрессию рецепторов на Т-лимфоцитах, при стимуляции митогенами способствует секреции лимфо-
кинов, тормозящих миграцию лейкоцитов, не проявляя при этом антигенных свойств; стимулирует кислородзависимые и кислороднезависимые процессы в фагоцитах, а также общую фагоцитарную активность лейкоцитов; ингибирует классический путь активации системы комплемента, замедляет свертывание крови, тормозит фибринолиз. Выявленные свойства эритроцитина позволяют заключить, что он обладает не только цитомединовым, но и иммуномодуляторным действием.
5.2. Влияние полипептидов эритроцитов, тималина и тимогена на эритропоэз, некоторые показатели иммунитета и гемостаза у беременных крыс
Учитывая выраженные изменения в иммуногенезе, гемостазе, неспецифической резистентности организма при гестационных анемиях, а также исходя из представления о наличии иммунного контроля за гемо-поэзом (Гольдберг Е.Д., Дыгай A.M., 1983), мы предприняли попытку включить в комплексную терапию анемий беременных иммунотропные препараты.
На беременных крысах с индуцированными фенилгидразиновой и постгеморрагической анемиями проведена сравнительная оценка действия на эритрон эритроцитина, тималина, тимогена и традиционных антианемических препаратов. Животным контрольной группы вводился физиологический раствор. ~
Установлено, что полипептиды эритроцитов оказывали наиболее выраженное положительное влияние на показатели эритрона животных с индуцированными анемиями.
Количество эритроцитов у животных с токсической анемией на 14-й день от начала введения эритроцитина возрастало в среднем на 78,3% (р<0,001), соответственно этому увеличивался и уровень гемоглобина (р<0,05). Содержание ретикулоцитов периферической крови увеличивалось в 2,2 раза и достигало показателей интактных крыс (р<0,001), что свидетельствовало о стимуляции эритропоэза в костном мозге.
Показатели системы эритрона у крыс с токсической анемией при использовании тималина и тимогена были приблизительно одинаковы и свидетельствовали о стимуляции эритропоэза, хотя и уступали таковым при воздействии эритроцитином. Количество эритроцитов у животных при введении иммуномодуляторов возрастало в среднем на 50% (р<0,05), число ретикулоцитов увеличивалось в 1,8 раза (р<0,01).
Динамика показателей эритрона у животных обследуемых групп с Индуцированной геморрагической анемией была более выражена, чем при. токсической анемии, что объясняется стимулирующим влиянием са-
мой кровопотери на эритропоэз. Однако, в группе животных, получавших эритроцитин, положительные изменения в эритроне были значительнее. Под влиянием полипептидов эритроцитов по сравнению с контрольными показателями в 2 раза увеличилось количество эритроцитов (р<0,001), в 2,1 раза - ретикулоцитов периферической крови (р<0,001), на 20% возрос уровень гемоглобина (р < 0,05).
Тималин и тимоген лучше, чем препарат железа и витамин, стимулировали эритропоэз у животных с геморрагической анемией, однако значительно уступали действию эритроцитина. Так, количество эритроцитов под влиянием препаратов тимуса увеличивалось в 1,7 раза (р<0,05), ретикулоцитов - в 1,5 раза (р<0,05), концентрация гемоглобина возрастала на 15,5 %.
У крыс с токсической и постгеморрагической анемиями, получавших Феррум Лек и витамин В\2, не выявлено признаков нормализации эритрона. » • "
Количество лейкоцитов у животных с индуцированными анемиями возрастало под влиянием эритроцитина, тимапина и тимогена (р<0,05). Традиционная антианемическая терапия в наших исследованиях влияния на белую кровь не оказывала.
У животных с экспериментальной фенилгидразиновой анемией в гистологических препаратах костного мозга отмечались признаки, свидетельствующие об угнетении эритропоэза.
У крыс, получавших с терапевтической целью Феррум Лек и витамин В12, по сравнению с контрольными животными, практически не отмечено динамики показателей эритропоэза в костном мозге. Тималин и тимоген оказывали стимулирующее влияние на гемопоэз; которое проявлялось в увеличении количества пронормоцитов. Костный мозг животных, получавших эритроцитин, характеризовался явным усилением эритропоэза: в среднем в 2 раза увеличивалось количество всех форм предшественников эритроцитов, ликвидировались признаки задержки ядерной дегенерации.
При постгеморрагической анемии как у контрольных, так и у опытных групп животных обнаружено сильное раздражение красного ростка, сопровождающееся увеличением количества всех переходных форм клеток. Однако, только применение эритроцитина приводило к ускорению конечных фаз дифференцировки и созревания эритроцитов: в этой группе животных в 6 раз, по сравнению с леченными традиционно, увеличивалось количество оксифильных нормоцитов и ретикулоцитов. Иммуно-модуляторы вызывали увеличение числа гронормоцитов (р<0,05). Гистологические картины костного мозга крыс контрольной группы и группы, получавшей препарат железа Феррум Лек и витамин В12 с целью лечения постгеморрагической анемии, практически не имели отличий.
Установлено, что у крыс во время беременности по сравнению с интактными животными развивалась выраженная гиперкоагуляция, тормозился фибринолиз, возрастала концентрация фибриногена и частота положительных реакций на этанол. У беременных крыс с фенилгидрази-новой анемией гиперкоагуляция и депрессия фибринолиза были еще более выражены и свидетельствовали о наличии хронического ДВС-синдрома.
Введение препарата железа Феррум Лек и витамина В12 не оказывало нормализующего влияния на систему гемостаза животных с токсической анемией. Тималин и тимоген удлиняли время свертывания крови, время рекальцификации плазмы, тромбиновое время, снижали концентрацию фибриногена, активировали фибринолиз (р<0,05). Эритроцитин оказывал менее выраженное, чем препараты тимуса, нормализующее влияние на показатели гемостаза беременных крыс с индуцированной анемией. Если в экспериментах in vitro полипептиды эритроцитов тормозили фибринолиз, то in vivo они его активировали, что объясняется увеличением концентрации проактиваторов плазминогена.
Клинические наблюдения за животными с экспериментальными анемиями подтверждают положительное влияние цитомединов. Так, при введении эритроцитина и иммунотропных препаратов, масса беременных крыс в динамике достоверно превышала массу контрольных животных. Под действием цитомединов крысы лучше принимали пищу, отличались большей двигательной активностью, у них не было столь выраженного выпадения шерсти, как у контрольных животных. Средний вес новорожденных крысят от самок, получавших эритроцитин, тималин и тимоген превышал таковой у потомства животных из контрольной и леченной традиционным способом групп.
Таким образом, полипептиды эритроцитов восстанавливают регенераторный потенциал эритрона при анемиях различного генеза, что позволяет отнести их к регуляторам эритропоэза. Стимулирующее влияние препаратов тимуса на эритропоэз осуществляется, вероятно, опосредованно через систему иммунитета, что подтверждается более выраженным, чем эритроцитин, их влиянием на показатели белой крови. Эритроцитин же действует на систему эритрона и как цитомедин и как имму-номодулятор. Полипептиды эритроцитов и иммуномодуляторы, в отличие от традиционных антианемических средств, оказывают влияние на свертываемость крови и фибринолиз, ликвидируя признаки ТГС. Восстанавливая показатели эритрона, гемостаза и иммуногенеза беременных крыс с индуцированными анемиями, эритроцитин, тималин и тимоген нормализовали функции фетоплацентарного комплекса, что приводило к уменьшению явлений внутриутробной гипотрофии у потомства.
6. Влияние антианемической терапии на иммунитет, гемостаз, неспецифическую резистентность, эритрон, уровень белков острой фазы и ИЛ-1
Результаты экспериментов на животных позволили предположить, что иммуномодуляторы окажутся эффективными средствами для лечения гестационного малокровия. Исследованиями С.Н. Султанова и соавт. (1990) показана высокая эффективность гепаринотерапии у больных анемиями беременных. Исходя из этого, интересно было проследить влияние различных способов лечения анемии на изучаемые показатели. Беременным назначали в комплексе с традиционными антианемическими средствами один из препаратов - тималин, тимоген или гепарин.
Динамика показателей эритрона, иммуногенеза, неспецифической резистентности организма, гемостаза, белков острой фазы и ИЛ-1 при лечении беременных с анемиями разными способами оказалась неодинаковой и подтвердила высокий терапевтический эффект иммунотропных препаратов.
Установлено, что комплексная антианемическая терапия с имму-номодуляторами, в отличие от традиционной, приводила к более быстрому и стабильному восстановлению показателей эритрона у беременных с анемиями, главным образом, за счет активации его регенераторного потенциала. Так, под действием тимапина и тимогена содержание ре-тикулоцитов увеличивалось соответственно в 2,7 и 3,1 раза (р<0,001), в то время как при использовании препаратов железа, витаминов и гепарина - в 1,5 раза (р<0,05).
В наших исследованиях тималин и тимоген оказывали сходное благоприятное воздействие на динамику показателей иммунитета, гемостаза, неспецифической резистентности, эритрона, содержание белков острой фазы и ИЛ-1. Однако, степень выраженности их влияния на показатели отдельных систем оказалась неодинаковой: тимоген сильнее действовал на иммуногенез и слабее, чем тималин, на коагулологические показатели. .Этот факт можно объяснить различием состава препаратов: в тималине содержатся пептидные фракции, влияющие на иммунитет, гемостаз, неспецифическую резистентность, регенерацию; тимоген же является дипептидом и действует только на иммунитет. Разумеется, терапия тималином имеет больше путей коррекции полисистемных нарушений при гестационных анемиях.
Общепринятый способ лечения анемий и гепаринотерапия, по нашим наблюдениям, не влияли на показатели клеточного иммунитета больных гестационным малокровием. Иммуномодуляторы нормализовали
содержание Т-лимфоцитов и их основных субпопуляций: "["-"активных" клеток, Т-хелперов, Т-супрессоров..
Препараты железа, витамины и гепарин нормализовали лишь концентрацию 1д М и не влияли на уровень 1д А, 1д в и содержание ЦИК. Комплексная терапия с иммунотропными препаратами привела к снижению концентраций 1д А и 1д М, которые максимально приблизились к показателям здоровых беременных. Концентрация 1д в при этом, напротив, повысилась, а при введении тималина достигла нормы. Иммунокорреги-рующая терапия способствовала уменьшению уровня ЦИК у больных ге-стационными анемиями, причем, понизилось содержание их мелкомолекулярной фракции, которая, как известно, обладает наибольшей патоген-ностью.
Общепринятая антианемическая терапия не ликвидировала имеющийся у больных гестационным малокровием ДВС-синдром. Введение гепарина на фоне традиционных антианемических средств нормализовало лишь некоторые показатели коагуляционного гемостаза: время свертывания крови и рекальцификации плазмы, тромбиновое время и не оказывало влияния на фибринолиз, концентрацию фибриногена, уровень ПДФ и АТ-Ш, частоту положительных реакций на этанол и протаминсуль-фат. Слабый эффект от применения гепарина у беременных с анемиями объясняется, очевидно, наличием затяжного ДВС-синдрома, при котором резко снижается концентрация АТ-Ш.
Иммуномодуляторы в комплексе с препаратами железа и витаминами оказали нормализующее влияние на свертывание крови и фибринолиз беременных с анемиями. Кроме положительных изменений в коагуля-ционном звене гемостаза, в 1,2 раза снизилась концентрация фибриногена и в 2,2 раза - ПДФ, в 1,2 раза повысилось содержание АТ-Ш; в 1,9 раза уменьшилась частота положительных реакций на этанол и в 1,8 раза - на протаминсульфат; в 1,4 раза активировался тотальный и в 1,3 ра